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24 小组赛的参赛球队一共来自24个不同的足协，其中还包括两个首次出现在欧洲草根足球网站赛场上的新面孔，摩尔多瓦和拉脱维亚。

犯规与不当行为 （1）队员故意违反下列九项中的任何一项者，即： 1.踢或企图踢对方队员。 2.绊摔对方队员，即在对方身后或身前，伸腿或屈体绊摔或企图绊摔对方。 3.跳向对方队员。 4.猛烈地或带有危险性地冲撞对方队员。 5.除对方正在阻挡外，从背后冲撞对方队员。 6.打准企图打草根足球网站对方队员准向对方吐唾沫。 7.拉扯对方队员。 8.推对方队员。 9.用手触球，例如：用手或臂部携带、推击球（守门员在本方罚球区内除外）。 注：2021年3月5日，国际足球协会理事会宣布对有关手球犯规的规则做出了调整，不是所有手球都算犯规。导致队友射门得分或获得得分机会的无意手球将不再被视为犯规。

脑震荡换人规则 2021年1月30日，据英超联赛官网，英超草根足球网站各足球俱乐部已经同意从2月6日开始启用脑震荡换人新规则。脑震荡换人新规则即如果场上出现疑似脑震荡情况裁判吹停了比赛，在队医进场评估后或回放中出现明显脑震荡证据，球队将允许使用额外换人名额。每场比赛每队只能用2次因脑震荡导致的额外换人名额，同时如果一方使用了额外脑震荡换人名额，对方也获得同等的常规换人名额。英超这项脑震荡换人新规则从2月6日试运行至赛季结束。